فحص التلازن الدموي

التلازن الدموي وتثبيط التلازن الدموي
Hemagglutination & Hemagglutination inhibition test .
يعتبر اختبار التلازن الدموي من الاختبارات المصلية التي تستعمل لتشخيص الفيروسات حيث ان لبعض الفيروسات االقابلية على تلزين كريات الدم الحمراء لعدد من الحيوانات.
تحضير عالق كريات الدم الحمراء:-
1- يؤخذ الدم من بعض الحيوانات مثل خنزير غينيا او الطيور بواسطة سحب الدم من القلب ويخلط مع محلول ألسيفر (Alsever?s solution) او الهيبارين لمنع تخثره.
2- تغسل كريات الدم الحمراء ثلاث مرات بواسطة Phosphate Buffer Solution (PBS) ويحضر10 % كخزين ,يحفظ في 4 م? لمدة لاتزيد عن الاسبوع.
3- يعمل 0.5 % عالق كريات الدم الحمراء باضافة 1 مل من الخزين (10 %)الى 19 مل من (PBS)قبل الاستعمال مباشرة.


معايرة الملزن الدموي Titration of Hemagglutination
يتم اختبار الوسط الزرعي الحاوي على الخلايا المصابة والتي تظهر امتزازا دمويا ويمكن ان تحتوي على الملزن الدموي الفايروسي وكالاتي:
1. باستعمال سائل الزرع النسيجي المصاب او سوائل البيضة المصابة يتم تحضير تخافيف ثنائية (1:10 الى 1:640) باستعمال (PBS) ويتم وضع حجم 0.05 لكل تخفيف في طبق المعايرة (Microtiter plate)يتم زيادة الحجم إذا تمت المعايرة في اطباق ذات حفر أكبر حجما.
2. نضيف 0.05 مل من عالق كريات الدم الحمراء 0.5لكل تخفيف في اعلاه ويترك الطبق لمدة ساعة الى ساعتين للسماح لكريات الدم الحمراء بالاستقرار.
3. يقرأ المعيار من خلال تحديد التخفيف الاعلى للعالق الفيروسي الذي يستطيع إحداث تلازن دموي كلي او جزيئي.