تأريخ التشخيص الفايروسي

المختبر الأول
تاريخ التشخيص الفيروسي
? تاريخ التشخيص الفيروسي:
إن العصر الحديث من علم الفايروسات الطبيه ابتدأ عام 1892 حين اكتشف العالم Guarneri الاجسام الضميه (Inclusion Bodies) الخارج سايتوبلازميه في اصابات ال Small Pox، وفي عام 1898 العالمانLoeffer & Frosch لاحظا اقدام وفم الماشيه المصابه ووجدا ان المسبب هو عباره عن جزيئات او جسيمات مرشحه (تستطيع العبور من ورقة الترشيح) والتي اطلق عليها فيما بعد بال (VIRUS)، وخلال القرن العشرين تقدم علم الفايروسات بتطور التقنيات المستخدمه في تشخيص الاصابات الفايروسيه.
من أول الطرق المستخدمة في التشخيص الفايروسي هي الطرق السيرولوجيه( Serological Methods ) والتي تعتمد على التشخيص المباشر لمستضدات الفايروس او الاضداد المتكونه ضده. تثبيت المتمم اكتشف في عام 1929 بواسطة العالمان (Bedsaon & Bland) والتي استخدماها لاول مره في تشخيص اصابات ال Small Pox و Vaccinia. ظهور تقنية Monoclonal Antibodies ظهرت عام 1970 في عام 1985 تم تطوير تقنية ال PCR المستخدمه في تشخيص الفايروسات.

? علم الفيروسات العملي
حتى مؤخرا كان يعتبر التشخيص الفايروسي من الفوحصات الغير سائده في المختبرات الطبيه، والاسباب وراء ذلك هي: اعتماد الاختبارات الفايروسيه على الانسجه الحيه والمزارع الخلويه والتي تكون بطيئه ومكلفه اضافه الى وجود تقنيات متقدمه مثل تقنيات ال PCR و ELISA وغيرهاوالتي يكون استخدامها غير اقتصادي ومكلفه اضافه الى توفرها بشكل محدود. ولهذا فان معظم المستشفيات لاتحوي على تقنيات عزل وتشخيص الفايروسات المهمه طبيا.
اما حاليا؛ فان تشخيص الفايروسات اصبح من الفحوصات المهمه والاساسيه وله تطبيقات واسعه في تشخيص معظم الامراض المهمه مثل (HIV، AIDS، SARS وغيرها) كذلك فان تشخيص وعزل الفايروسات ساعد في منع الاصابات الفايروسيه من خلال تصنيع مضادات فايروسيه ولقاحات ساعدت في انحسار العديد من الامراض الفايروسيه مثل لقاحات (شلل الاطفال واللقاح الثلاثي.....الخ) .

? من أهم الطرق المستخدمة في التشخيص الفايروسي هي:
1. (PCR) Polymerase Chain Reaction
2. (ELISA) Enzyme-Linked Immunoassay: يستخدم لمعرفة وجود مناعه متخصصه ضد الفيروس.
3. (CF) Complement Fixation: يستخدم لمعرفة وجود مناعه متخصصه ضد الفيروس.
4. (HI) Haemagglutination Inhibition: يستخدم لمعرفة وجود مناعه متخصصه ضد الفيروس.
5. (IF) Immunofluorescence: يستخدم لمعرفة وجود مناعه متخصصه ضد الفيروس.
6. Latex: يستخدم لمعرفة وجود الفايروس او اجزاءه المستضديه.
7. (EM) Electron Microscope: يستخدم لتحديد تاثير الاصابه الفايروسيه في الانسجه والاعضاء ولتعريف دور الاصابه الفيروسيه في احداث المرض.
8. (VC) Viral Culture: تستخدم لتشخيص المستضدات الفايروسيه والحامض النووي.

يعتبر التشخيص الفيروسي مهما في بعض المناطق اكثر من غيرها نظرا لمجاميع المرضى والذين تتطلب رعايتهم استخدام تقنيات التشخيص الفايروسي مثل مرضى ال (AIDS و Hepatitis و STD و Acute Respiratory Infections) كما يعتبر التشخيص الفايروسي مهما على صعيد الصحه العامه فمثلا؛ ظهور امراض مثل Rubella و Measles يحفز على بدء مشروع تمنيع (تلقيح) ضد هذين الفايروسين او عند ظهور امراض فايروسيه منقوله بواسطة الحشرات مثل (Arboviral Encephalitis المنقول بواسطة البعوض Mosquito) يحفز على بدء مشروع مكافحة الحشرات الناقله للمرض لمنع انتشاره او تشخيص اصابات بفيروس ال Norwalk virus او Rotavirus او Calcivirus والمسببه لامراض الجهاز الهضمي تدفعنا للسيطره على منابع انتقال المرض مثل الماء والطعام الملوثين.

? العينات المستخدمة في التشخيص الفايروسي
إن دقة التشخيص الفايروسي تعتمد بشكل اساسي على العينات المأخوذه من المرضى اضافة الى العلامات السريريه (Clinical Symptoms) فهناك عدة تغيرات مهمه يجب اخذها بعين الاعتبار عند جمع ونقل العينات فمثلا:
1. تاريخ اخذ العينه.
2. نوع وكمية العينة الماخوذه.
3. ظرف وطريقة نقل العينه.
كل النقاط أعلاه تعتبر أساسيه ومهمة في عملية التشخيص الفايروسي.
في حالات الاصابات الفايروسيه الحاده يكون من الافضل اخذ العينات من مكان الاصابه مثلا ؛ في حالات الاصابه ب (Viral Meningitis) يكون فحص عينات (CSF) افضل في معرفة الاصابه ، او في حالات اصابات البشره او الاغشيه المخاطيه فان العينات تكون من سطح البشره او من الاغشيه المخاطيه المصابه. كذلك فان عيارية الفايروس (اعداد الفايروسات المتواجده في منطقة الاصابه) تكون اعلى في بداية المرض لذلك فان اخذ العينه في الايام الاولى من ظهور المرض او اعراضه تكون اكثر ملائميه لاعطاء نتائج ايجابيه وصحيحه.
في حالات الزرع الفايروسي فان هذه الطريقه تحتاج لاهتمام اكثر خلال عملية الزرع وطريقة النقل مقارنة بالطرق الاخرى وذلك لان حيوية الفيروس يجب ان تحفظ.
عينات الدم المشكوك بحملها للفايروس يجب ان تحفظ بدرجة (4 م°) عند النقل خصوصا اذا استغرق النقل ساعه او اكثر اما اذا تاخر النقل اكثر من 24 ساعه فيجب تجميد العينه بدرجة (-70 م°).
في الفحوصات السيرولوجيه ؛ عينات المصل يجب ان تستحصل خلال الايام الاولى من الاصابه وعند توفر الاضداد الخاصه بالفايروس (Specific Virus Antibodies) فان العينه وحدها تكون مؤثره علما بان الاميونوكلوبيولينات تكون نسبها ثابته في المصل والبلازما. اذا كانت العينات ستخزن لايام فيجب خزنها بدرجة (4 م°) أما إذا كانت ألمده أطول فيجب تجميد العينه بدرجة (-20 إلى -70 م°).
من أكثر الحالات ألسريريه التي تتطلب فحصا مختبريا للتحري عن الفيروس هي:

1. Respiratory infections.
2. Gastroenteritis.
3. Mumps.
4. Rubella.
5. Measles.
6. Herpes.
7. Cytomegalovirus.
8. Hepatitis.
9. Meningitis.
10. HIV infection.